Ritratto di John Chambers

John Chambers aveva circa 73 anni quando Holbein lo ritrasse nel 1543, per cui l'iscrizione sullo sfondo, che gliene attribuisce 88, è semplicemente sbagliata. Fu aggiunta quando lo sfondo venne rifatto in epoca successiva. Chambers era uno dei medici di Enrico VIII e nel 1518 era stato tra i fondatori del Collegio dei medici di Londra. Holbein studiò il suo volto anche per un'altra commissione, il grande ritratto di gruppo in cui il re consegna una carta ai barbieri-chirurghi di Londra e Chambers compare tra i medici di corte. Quel dipinto era ancora incompiuto quando Holbein morì a Londra nell'autunno del 1543, e il ritratto di Vienna è tra gli ultimi che riuscì a portare a termine. In seguito appartenne al conte di Arundel, il grande collezionista inglese, e poi all'arciduca Leopoldo Guglielmo.